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无需扫描! SPINDLE可实现3D高精度单分子定位成像!

更新时间:2022-08-01 点击次数:1310
不需要扫描机! SPINDLE可控制3D高精确度单碳原子定位系统成相!


介绍书


超辨认率显微显像一题材是能否使研究探讨者是能否“打碎"光学仪器高倍高倍显微镜观察衍射思维障碍的的办法,在该题材的办法中辨认率高的工艺为光更改密码分析显微工艺(PALM)。一些的办法忽略于在数万帧中对单一大分子的随机性子集做分析(SMLM),并将一些个体工商户的分析抽象化为单一超辨认率数字图像。过去的的分析高倍高倍显微镜观察能否在侧向维度空间上做10~20nm的精确度显像,为了能让构建更为重要的分析精密度较,必须高倍高倍显微镜观察配制更具更为重要信噪比的迟钝观测器。哪怕侧向辨认率令人感动成都印象印象深刻,但过去的的2D SMLM仍一般性匮乏径向辨认率。


芬兰Double Helix Optics装修公司的SPINDLER一系列3D体视电子显微镜显像模组与3DTRAXR平台相融入,可在三维彩色图像绝对误差上改变高的精细制造度、亚衍射极限法定位体统,并兼备发展的深层次显像技能。SPINDLE通过精细制造光学反应元器方案,可与市售上在售的合理体视电子显微镜无接缝结合,并出示qian 所wei 有的双重和载荷精细制造显像女子组合。客户可会根据基本的操作选择为宜的相位掩免费模板以改变应用场景深层次比率、发射点光谱和信噪比等参数指标对点传播数学函数(PSF)的优化提升,更重要的的是,SPINDLE可在不用扫码的时候传到一张彩色图像开国中将传统文化显像体统的景深不断扩大10倍。


在这段话中,我们公司展示会了如果将SPINDLE显像系统化与经典荧光高倍显微镜紧密联系操作以在几乎所有以下三个角度(x、y、z)上保证 亚衍射限制显像。SPINDLE可与一切优质化量的科学合理摄像头兼容,究竟是emccd亦或是scmos可以展示 追踪定位高倍显微镜所需要的高信噪比图文。


用(yong)到(dao)SPINDLE和DH-PSF相位掩(yan)范例对内部微(wei)管使用(yong)三维(wei)图像(xiang)超辨认(ren)三维(wei)成像(xiang)


在今天中,自己证实了选择SPINDLE单工作区模组可能保证高表面粗糙度、大进一步的超辨认率从建。下图1右图,选择Double Helix (DH-PSF) 的相位掩免费模板与SPINDLE单大团伙准确品牌定位高倍显微镜构件切合。操作系统将一个大团伙传出的光分给二个光瓣,实现查到二个光瓣的重心来索引闪光点的双重(x-y)方位;两光瓣两者的的角度商品代码了闪光点的支承(z)方位。这个格外的的信息将还可以在双重和支承图片尺寸上用尤其高的表面粗糙度(<20nm)来超辨认率从建。前者,SPINDLE扩张了大团伙可能准确品牌定位的景深,这一精准度度和扩张进一步激光散斑的切合还可以以显得的提升的z轴辨认率以抽取太多的数据统计。


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图1:鉴(jian)于单分子式(shi)追踪定位(wei)显微三维成(cheng)像(xiang)技術(SMLM)技術的(de)有可(ke)交(jiao)换(huan)相位(wei)掩(yan)模框(kuang)架(jia)的(de)SPINDLE控制(zhi)模块


只为操作SPINDLE的做工作机理,他们选择NikonN-STORM光学显微镜搭配Photometrics Prime 95B手机对被AlexaFluor 647偶联微管核蛋白抗体阳性箭头的Cos7受损细胞开始了三维三维成像。而对于该试品,他们选择经优化调整的相位掩免费模板,该掩免费模板可与远红外主波长纺织染料和1.49 NA的100倍物镜紧密配合选择。试品在640 nm脉冲光不间断射进来的角传到Prime95B上三维三维成像,瀑光时段为30 ms。选择3DTRAX工具对单射点开始导航定位,并将结杲拷贝到ImageJ插件操作Thun-der STORM。选择归一化高斯手段改造图文,并选择ImageJ查看表“Spectrum"以配色对z进一步开始编写代码。


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图(tu)2:每个(ge)100nm珠在(zai)Prime95B上用SPINDLE在(zai)焦(jiao)平行面(mian)图(tu)(0µm)和焦(jiao)平行面(mian)图(tu)下面(mian)(+1µm)和下面(mian)(-1µm)2um处的成(cheng)相图(tu)


重塑的结论含有高于200万个标记,并界面提示 Cos7生殖生殖细胞中微管的30µmx30µm视线、强度高于2.1µm的超规模(图3左)。强度以配色标识号,生殖生殖细胞顶端为红白色/青色,上端付近为金色/红色。变小的插画图片界面提示 微管在一定的强度超规模内取到了更好的重塑(图3,右)。这数据分析明确了运用Double Helix SPINDLE输出模块给我们的拓张景深成相和高纵向和心轴分辩率。


应用Double Helix 3DTRAX系统来进行(xing)高导致精度三维空间标(biao)记(ji)


Double Helix 3DTRAX软件下载是个ImageJ/FIJI手机插件,其还可以在横排和载荷以亚衍射超凡高精准度准确定位手机功能独立碳原子。3DTRAX还在使用克垃美-拉奥低限(CRLB)5算起了每次准确定位手机功能碳原子的高精准度值。该算起针对每次准确定位手机功能的信噪比。


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图(tu)(tu)(tu)(tu)3:应用SPINDLE(R)和Prime 95B成相的(de)微管二维超判断率(lv)复建图(tu)(tu)(tu)(tu)。左图(tu)(tu)(tu)(tu):Cos7组织细(xi)胞(bao)免疫力复染(ran)的(de)微管蛋清,有颜色商品代码程度(du)(du)。右(you)图(tu)(tu)(tu)(tu):左面图(tu)(tu)(tu)(tu)形的(de)扩大(da)区域内,表现了程度(du)(du)小于(yu)2微米(mi)换算的(de)微管。小图(tu)(tu)(tu)(tu)片由Double Helix Optics展示(shi)。峰值CRLB值横截面约(yue)10nm,支(zhi)承约(yue)20nm(图(tu)(tu)(tu)(tu)3)


总体


Double Helix的SPINDLE超判定率3D显微成相模组、相位掩模和3DTRAXAPP的搭配组合可建立高精确大深层3d成相、定位跟踪和运算。抱歉软件中,我们的在亚受损内部膜设备构造的3d超判定率重塑中展现了一般在10nm的双向精确和20nm的支承精确。SPINDLE系列表产品设备为论述人数带来了了坚强的工具软件集,可利于对多生物工程平台中分刘海子设备构造、亚受损内部膜和受损内部膜内互相目的的看法。


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图(tu)4:横面和轴(zhou)径gps可(ke)靠性强,精密度(du)。用(yong)在(zai)恢复图(tu)2如图(tu)图(tu)片(pian)的(de)准确定位(wei)手机gps可(ke)靠性强,精密度(du)值。gps可(ke)靠性强,精密度(du)值由3DTRAX应用(yong)利用(yong)其信噪比应用(yong)每卫星发(fa)射器的(de)Cramer-Rao下界5算(suan)起测得。准确定位(wei)手机数显仪表示在(zai)y轴(zhou)上,gps可(ke)靠性强,精密度(du)值(nm)提(ti)示 在(zai)x轴(zhou)上


想关文献资料;

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并于Double Helix Optics

英国Double Helix Optics是一个家靠近英国科罗拉多州博尔德的计算公式光学装修材料平台。Double Helix Optics用其zhuan利的双槽式光工业激光散斑技巧的设计制作下这一代高表面粗糙度3D激光散斑设备,多方面选用在自己生物医学工程课和装修材料合理课业务领域以满足对亚生殖细胞格局3D的激光散斑、跟踪软件和筛选。Double Helix的SPINDLE编成相包块与可切换桌面的相位掩模库并且 用作计算出整修和分折的平台相运用,确保安全为小编的企业客户还有科技应用的大概情况发生带来了优效率的3D成相科技。


关干昊(hao)量(liang)光電:

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